Print
Biotechnology: Determination of Optimal Conditions for the Production of Laccase Enzyme by Local Isolate of Bacillus sp.

 

Determination of Optimal Conditions for the Production of Laccase Enzyme by Local Isolate of Bacillus sp.

Yassamin Nahil Shukur

Department of Biotechnology, College of Science, University of Baghdad, Baghdad, Iraq

Abstract:

   Fifty isolates of Bacillus sp. were subjected to the first and second screening to detect the ability to produce laccase enzyme and select the highest ones production of laccase on Petri plates containing nutrient agar supplemented with Cu2+.

Syringaldazine was used as an indicator and substrate for the determination of laccase activity. Three isolates, which consumed less time to developed pink color were tested for the production of laccase quantitatively. The effective isolate B16 with significant amounts of laccase 1.84 unit /ml was selected for laccase study.

   The optimization studies revealed that the maximum laccase production was achieved when the production medium was at the following conditions: 5 days of incubation, temperature 35 C°, pH 7.0, copper sulphate 0.2 mM, galactose 3% as carbon source, 0.2% Tryptone as nitrogen source and K+ 1mM.

تحديد الظروف المثلى لانتاج انزيم Laccase من العزلة المحلية .Bacillus sp

ياسمين ناهل شكر

قسم التقنيات الاحيائية، كلية العلوم، جامعة بغداد، بغداد, العراق

الخلاصة

   اخضعت 50 عزلة من بكتريا Bacillus لمرحلتي الغربلة الاولية والثانوية لكشف قدرتها على انتاج انزيم Laccase في وسط مغذي مدعم بأيونات النحاس ولغرض انتقاء العزلة الاكثر انتاجآ للانزيم. استعمل ال Syringaldazine ككاشف ومادة اساس في تحديد فعالية الانزيم. ثلاث عزلات فقط استغرقت وقتآ قليلآ في اظهار اللون الوردي في الفحص النوعي وقد تم اختيارها في دراسة الفحص الكمي لانتاج الانزيم . تم اختيار العزلة B16 ذات الفعالية العالية (1.84)U/ml لدراسة ال Laccase.دراسة الظروف المثلى اظهرت بأن اعلى انتاجية للانزيم كانت عند الحضن لمدة 5 ايام وبدرجة حرارة 35م°وبرقم هيدروجيني 7 في وسط حاوي على :0,2 ملي مول من كبريتات النحاس و3% كالاكتوز مصدرآ للكاربون و0,2% تريبتون مصدرآ للنايتروجين و1 ملي مول بوتاسيوم .


alt