Photo Photo Photo Photo Photo Photo
Print
E-mail
Biology: Production, Purification and Characterization of Uricase Produced by Pseudomonas aeruginosa

 

Production, Purification and Characterization of Uricase Produced by Pseudomonas aeruginosa

Suhad K. Abdullah, May T.Flayyih

Department of Biology,College of Science,University of Baghdad, Baghdad ,Iraq

Abstract

      In this study, detection of uricase production from Pseudomonas aeruginosa isolates was done by applying colorimetric method, Uricase was purified from the most potent isolate by precipitation using ammonium sulphate (80% saturation) then purification was achieved using DEAE –Cellulose ion exchange and Sepharose 6B gel filtration chromatography column, 16.4% of total enzyme was recovered with specific activity 2337.5U/mg and 22.21folds of purification. Characterization of uricase involved detection of optimal conditions for uricase activity, the maximal activity was obtained at temperature 45ºC,while uricase appeared to be stable at 40ºC. Uricase showed optimal activity at pH  9 while  pH  stability  was  in  the  range of 7.5-9. Molecular weight of uricase obtained in this study determined by sodium dedosyl sulfate electrophoresis (SDS-PAGE) technique was approximately 35kDa.

انتاج ، تنقية وتوصيف انزيم اليوريكيز المنقى من بكتريا Pseudomonas aeruginosa

سهاد كاظم عبدالله، مي طالب فليح

قسم علوم الحياة, كلية العلوم, جامعة بغداد, بغداد، العراق.

الخلاصة

      في هذا البحث تم انتاج انزيم اليوريكيز  من بكتريا   Pseudomonas aeruginosaكمياً باعتماد الطريقة االلونية كما تم تنقيته باستخدام   الترسيب بملح كبريتات الامونيوم عند نسبة اشباع 80% ثم كروماتوغرافيا التبادل الايوني باستخدام المبادلDEAE-Cellulose   والثانية باستخدام كروماتوغرافيا الترشيح الهلامي باستخدام هلام Sepharose 6B حيث تم الحصول على نسبة ارجاع بلغت16.4 % من الانزيم وفعالية نوعية 2337.5وحدة/ملغم وبعدد مرات تنقية بلغت22.21 . اظهر الانزيم فعالية مثلى عند درجة حرارة   45درجة مئوية ثباتية عند 40 درجة مئوية وفعالية مثلى عند الاس الهيدروجيني 9 والثباتية عند اس هيدروجيني تراوح بين7.5-9)) و قدر الوزن الجزيئي للانزيم بتقنية الترحيل الكهريائي باستخدام الاكريل امايد  المتعدد SDS-PAGE حيث بلغ الوزن الجزيئي للانزيم تقريبا 35 كيلودالتون.


alt

 

S5 Box

Login



Register

*
*
*
*
*

Fields marked with an asterisk (*) are required.