Photo Photo Photo Photo Photo Photo
Print
E-mail
Biotechnology: Extraction, Purification and Characterization Of Peroxidase From cabbage (Brassica oleracea Var) .

 

Extraction, Purification and Characterization Of Peroxidase From cabbage (Brassica oleracea Var) .

Ayat adnan Abbas

Biotechnology Research Center/Al-Nahrain University, Baghdad, Iraq

Abstract

     The activity of peroxidase (POD) in cabbage was evaluated using spectrophotometric method. The enzyme was extracted from the cabbage leaves with 0.1 M phosphate buffer solution pH 7. 0 . POD activity was determined using (O-dianisidine) as a substrate. The effects of the amounts of enzyme extract, substrate concentration, pH and temperature were investigated. The highest activity of POD was recored  at 2 mg/ml.  The highest activity of POD was   optimized with 16  mM O-dianisidine, The optimum  pH  was 7.0 for  POD , The optimum temperature  was 30°C for  POD. These optimum conditions were used to determined the enzyme activities in cabbage sample. Acetone fractionated peroxidase from crude extract of Brassica oleracea leaves (Cabbage) was purified on DEAE-Cellulose chromatographic columns. The specific activity of purified POD is 103.70  (U/mg) ,which is 5.37 times more than the crude extract with  28.72%   recovery. Maximum pH, thermal activity and stability of this purified enzyme are also determined were 40°C  .

استخلاص وتنقية وتوصيف انزيم البيروكسديز من اللهانة   (Brassica oleracea Var)

ايات عدنان عباس

مركز بحوث التقنيات الاحيائية / جامعة النهرين ، بغداد, العراق

الخلاصة

     أستخلص انزيم البيروكسديز من اوراق اللهانة , باضافة دارىء فوسفات الصوديوم بتركيز مولار 0.1 برقم هيدروجيني  7. 0 وتم تقدير الفعالية الانزيمية باستعمال المطياف الضوئي. قدرت الظروف المثلى لتفاعل الانزيم ،  باستخدام  تراكيز من الانزيم ، وتركيزالمادة الاساس (اورثوداي انسيدين) ، اضافة الى الرقم الهيدروجيني ودرجة الحرارة . سجلت  اعلى  فعالية  لانزيم البيروكسديز عند تركيز 2 ملغم / مل , اما تركيز المادة الاساس اورثوداي انسيدين فقد سجلت  اعلى فعالية عند تركيز16 ملي مولار وسجلت اعلى فعالية لانزيم البيروكسديز عند الرقم  الهيدروجيني  7.0 ولوحظت اعلى فعالية لهذا الانزيم عند درجة الحرارة º 30م .نقي أنزيم  البيروكسديز  من مستخلص اوراق اللهانة باستخدام الترسيب بالاسيتون ومن ثم باستخدام تقنية التبادل الايوني وسجلت الفعالية  النوعية 70 103. (وحدة / ملغم) مع عدد مرات التنقية  5.37 و حصيلة 28.72% , وكانت اعلى فعالية مسجلة للانزيم عند الرقم الهيدروجيني الامثل والثبات عند القيم 5.0 و 6.0 على التوالي. في حين  اعلى فعالية مثلى وثبات  عند درجة الحرارة المثلى والثبات عند  40 ºم  .


alt

 

S5 Box

Login



Register

*
*
*
*
*

Fields marked with an asterisk (*) are required.