Photo Photo Photo Photo Photo Photo

Print
E-mail
Biotechnology: PARTIAL PURIFICATION AND CYTOTOXIC ACTIVITY OF L-ASPARAGINASE ISOLATED FROM Escherichia coli

 

Partial purification and cytotoxic activity of
L-asparaginase isolated from
Escherichia coli

 

Ayat Adnan Abbas, Majeed A. Sabbah, Omer Abid Kathum

Biotechnology Research Center, University of Al Nahrain. Baghdad-Iraq.

 

Abstract

     L-Asparaginase (E.C.3.5.1.1) is an important natural product that possesses a broad spectrum of antitumor activity. In the present study, L-asparaginase partially purified from local isolate of Escherichia coli that were grown aerobically for four hours and anaerobically for 18hrs on M9 medium contain L-asparagine as sole nitrogen source. Extraction of the enzyme was done by sonication. Qualitative and quantitative assays for L-Asparaginase production were determined using colorimetric and nesslerization methods respectively. The purification steps involve dialysis of crude extract and DEAE-Cellulose Ion exchange chromatography. The enzyme was purified 3.39-folds and showed a final specific activity of 0.18 U/mg with a 41% yield. The crude extract and DEAE-Cellulose fractions showed slight growth inhibition against RD cell line (human rhambdomyo sarcoma).

 

التنقية الجزئية والفعالية السمية الخلوية لانزيم الاسباراجينيز المعزول من بكتريا القولون

 

ايات عدنان عباس، ومجيد ارشيد سباح، عمر عبد كاظم

مركز بحوث التقنيات الاحيائية، جامعة النهرين. بغداد-العراق.

 

الخلاصة

     انزيم الاسباراجينيز(E.C.3.5.1.1) المعزول من بكتريا القولون من الانزيمات المهمة التي لها فعالية كبيرة ضد الخلايا السرطانية. في هذه الدراسة تم تنقية الانزيم جزئيا من بكتريا القولون المعزولة محليا بعد تنميتها هوائيا لمدة اربعة ساعات ولاهوائيا لمدة 18 ساعة في وسط M9 الذي يحتوي على الاسباراجين كمصدر وحيد للنايتروجين. استخلص الانزيم من البكتريا بطريقة الامواج فوق الصوتية. تم استخدام الطريقة اللونية للقياس النوعي للانزيم وطريقة النسلرة للقياس الكمي.

تم تنقية الانزيم بعمل ديلزة للمستخلص الانزيمي ثم استخدام المبادل الايوني الموجب DEAE. وتم الحصول على عدد مرات تنقية 33.9 بفعالية نوعية نهائيةU/mg 0.18 وحصيلة 41%. اظهرت نماذج المستخلص الانزيمي ومابعد التنقية بالعمود نسبة تثبيطية قليلة ضد الخط الخلوي (سرطان العضلات البشري) RD cell line.




alt

 

S5 Box

Login



Register

*
*
*
*
*

Fields marked with an asterisk (*) are required.